ПРОПЕДВНУТР Болезней - определение концентрации гемоглобина
Пятница, 09.12.2016, 20:27
Приветствую Вас Гость | RSS

Мой сайт

определение концентрации гемоглобина

определение концентрации гемоглобина

Колориметрический метод Соли

Принцип метода: гемоглобин крови смешивают с соляной кислотой, превращая его в солянокислый гематин, и сравнивают цвет полученного рас­твора с имеющимся в гемометре Сали стандартом.

Оборудование и реактивы:

1. Гемометр Сали (визуальный гемоглобинометр).

2. Пипетка от гемометра Сали.

3. 0,1МНС1.

4. Дистиллированная вода.

5. Пипетка

6. Стеклянная палочка

7. Копья-скарификаторы.

Гемометр Сали представляет собой простейший колориметр, имеет пла­стмассовый корпус, задняя стенка которого сделана из матового стекла, рассеи­вающего свет. В корпус вмонтированы три небольшие стеклянные пробирки. Две боковые, запаянные с обоих концов, содержат стандартный раствор хлори­да тематика в глицерине. Цвет жидкости в стандартных пробирках соответст­вует цвету 2 %-ного раствора хлорида гематина. На всех трех пробирках нане­сены две круговые метки: нижняя соответствует вместимости 0,2 мл, верхняя — 2 мл. Пробирки установлены на горизонтальной пластине и при равенстве их диаметров все круговые метки должны находиться на одном уровне. Средняя пробирка гемометра имеет 2 шкалы. Одна с делениями от 0 до 23 служит для определения гемоглобина в грамм-процентах; другая шкала с делениями от 0 до 140 показывает единицы гемоглобина (процент гемоглобина). К гемометру прилагается капилляр, имеющий одну отметку 0,02 мл (капилляр Сали); рези­новая трубочка со стеклянным наконечником, 2 тонкие стеклянные палочки, глазная пипетка.

Ход исследования. В градуированную пробирку гемометра, находящую­ся в среднем прорезе, наливают децинормальный раствор НС1 до нижней кру­говой метки 0,2 мл (2 г%) и вставляют ее в гемометр Сали. Капилляром Сали вносят в эту пробирку 0,02 мл крови, причем кровь выдувают осторожно, чтобы не допустить образования пузырей, на дно пробирки. Не вынимая капилляр из пробирки, его 2-3 раза прополаскивают надосадочным прозрачным раствором 0,1 N НС1, потом извлекают из жидкости, прикасаясь его кончиком к стенкам пробирки, выдувают остатки жидкости и достают капилляр из пробирки. Кровь тщательно перемешивают с соляной кислотой и оставляют на 5 мин. За это время эритроциты гемолизируются и гемоглобин превращается в хлорид гема-тина бурого цвета. По истечении указанного времени к испытуемой жидкости по каплям добавляют дистиллированную воду. Содержимое пробирки разме­шивают тонкой стеклянной палочкой. Разведение продолжают до полного сов­падения цвета жидкости в градуированной пробирке с цветом стандартов. На шкале пробирки находят деление, соответствующее уровню жидкости по ниж­нему мениску Цифра деления шкалы обозначает количество гемоглобина в процентах. При концентрации гемоглобина менее 6,7 г% можно брать два ка­пилляра Сали крови с тем же количеством НС1 (т. е. НС1 наливается до нижней круговой метки) полученный результат делят на 2. Количество гемоглобина при оформлении анализа записывают в г/л. Для этого полученный результат умножают на 10.

Форма входа
Поиск
Календарь
«  Декабрь 2016  »
ПнВтСрЧтПтСбВс
   1234
567891011
12131415161718
19202122232425
262728293031
Статистика

Онлайн всего: 1
Гостей: 1
Пользователей: 0