ПРОПЕДВНУТР Болезней - Оценка полученных данных.
Пятница, 09.12.2016, 20:26
Приветствую Вас Гость | RSS

Мой сайт

Оценка полученных данных.

Оценка полученных данных. В норме концентрация в крови гемогло­бина составляет у женщин 120-140 г/л (12-14 г%), у мужчин — 130-160 г/л

Определение гемоглобина унифицированным гемоглобинцианидным методом

Принцип метода: гемоглобин окисляют железосинеродистым калием (красная кровяная соль) в метгемоглобин (гемиглобин). Образующийся при взаимодействии гемиглобина с ацетонциангидрином окрашенный гемоглобин-цианид определяют фотометрически. Его интенсивность пропорциональна со­держанию гемоглобина.

Оборудование и реактивы:

1 . Смесь реактивов для приготовления трансформирующего раствора: калий железосинеродистый (красная кровяная соль) — 200 мг; натрия бикарбо­нат — 1 г; ацетонциангидрин — 0,5 мл; дистиллированная вода — до 1 л.

2. Стандарт гемоглобина (лиофилизат).

3. Фотоэлектрокалориметр, спектрофотометр или гемоглобинометр.

4. Пипетка на 0,02 мл.

5. Колба мерная на 1,0 л.

Приготовление трансформирующего раствора: смесь реактивов и ацетон­циангидрин количественно перенести в мерную колбу емкостью 1 л, довести до метки дистиллированной водой и перемешать.

Приготовление стандартного раствора: вскрыть флаконы с лиофилизатом гемоглобина. Растворить содержимое флакона в 5 мл трансформирующего рас

твора и перемешать, избегая вспенивания. Хранить стандартный раствор при 2-8°С.

Методика: 0,02 мл крови (капилляр Сали) приливают к 5 мл трансфор­мирующего раствора (разведение в 251 раз) и перемешивают. Через 10 мин на фотоэлектроколориметре измеряют оптическую плотность при длине волны 500-560 нм (зеленый светофильтр) относительно «холостой» пробы (трансфор­мирующий раствор). Для определения концентрации гемоглобина при этих же условиях измеряют оптическую плотность стандартного раствора.

Рассчитывают концентрацию гемоглобина (НЬ) (г/л) по калибровочному графику, построенному по стандартному раствору гемоглобинцианида или по формуле:

НЬ = (А пробы / А стд) х С стд х К х 0,01,

где А пробы — оптическая плотность опытной пробы; А стд — оптическая плотность стандартного раствора; С стд — концентрация гемоглобинцианида в стандартном растворе; К — коэффициент разведения крови; 0,01 — коэффици­ент пересчета мг% в г/л.

Измеряют против «холостой» пробы на спектрофотометре при длине волны 540 нм или на гемоглобинометре.

Пределы колебаний концентрации гемоглобина у здоровых людей: у мужчин — 130-160 г/л, у женщин — 120-140 г/л.

Форма входа
Поиск
Календарь
«  Декабрь 2016  »
ПнВтСрЧтПтСбВс
   1234
567891011
12131415161718
19202122232425
262728293031
Статистика

Онлайн всего: 1
Гостей: 1
Пользователей: 0